Effects of ultrasound and stretching on skeletal muscle contusion in rats: immunohistochemistry analysis / Efectos de ultrasonido y estiramiento en la contusión muscular esqueletal en ratas: análisis inmunohistoquímico

SUMMARY: The aim of this study was to evaluate the effects of stretching and therapeutic ultrasound (TUS) on desmin and laminin contents of rat muscle after contusion. Male Wistar rats (n = 35, 8-9 weeks of age, 271 ± 14g body weight) were divided into five groups: Control group (CG) (n= 03); Injured group (IG) (n= 8); Injured + ultrasound group (IUSG) (n= 8); Injured+stretching group (ISG) (n= 8); Injured +ultrasound + stretching group (IUSSG) (n= 8). The application of ultrasound started 72 hours after the contusion, using the 50 % pulsed mode, 0.5 W/cm2, 5 min, once a day, for five consecutive days. Passive manual stretching was started on the tenth day after injury, with four repetitions of 30 s each and 30 s rest between repetitions, once a day, five times per week, for a total of ten applications. After 22 days, the rats were euthanazied and the gastrocnemius of both limbs removed for desmin and laminin immunohistochemistry morphometric measurement. Analysis was conducted using ANOVA one way post-hoc Tukey to parametric data and Kruskall-Wallis for non-parametric data. The IUSSG animals showed a larger area of desmin than ISG (p<0.05). It was found a decrease in laminin comparing IUSG to IG. However, laminin area was higher in ISG than all groups (p<0.05). UST isolated or in combination with stretching influenced gastrocnemius regeneration in different manners. While stretching applied isolated enhanced gastrocnemius regeneration noticed by the increase in laminin area, in combination with TUS strengthened the muscle healing rising desmin area.

RESUMEN: El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos del estiramiento y la ecografía en los contenidos de desmina y laminina del músculo de rata después de la lesión. Ratas Wistar macho (n = 35, 8-9 semanas de edad, 271 ± 14 g de peso corporal) se dividieron en cinco grupos: grupo de control (CG) (n = 03); Grupo lesionado (GL) (n = 8); Lesionado + grupo de ultrasonido (LGU) (n= 8); Lesionado + grupo de estiramiento (LGE) (n = 8); Lesionado + ultrasonido + grupo de estiramiento (LUGE) (n = 8). La aplicación de ultrasonido comenzó 72 horas después de la lesión, usando el modo pulsado al 50 %, 0,5W / cm2, 5 min, una vez al día, durante cinco días consecutivos. El estiramiento manual pasivo se inició el décimo día después de la lesión, con cuatro repeticiones de 30 seg cada una y 30 seg de descanso entre repeticiones, una vez al día, cinco veces por semana, para un total de diez aplicaciones. Las ratas fueron sacrificadas después de 22 días, y se extrajo el músculo gastrocnemio de ambos miembros para la medición morfométrica de desmina y laminina a través de inmunohistoquímica. El análisis se realizó utilizando ANOVA unidireccional Tukey post-hoc para datos paramétricos y Kruskall-Wallis para datos no paramétricos. Los animales LUGE mostraron un área mayor de desmina que LGE (p <0,05). Se encontró una disminución en la laminina comparando LGU con GL. Sin embargo, el área de laminina fue mayor en LGE que en todos los grupos (p <0,05). El tratamiento con ultrasonido aislado o en combinación con estiramiento influyó en la regeneración del músculo gastrocnemio de diferentes maneras. Si bien el estiramiento aplicado, en combinación con tratamiento de ultrasonido, fortaleció el área de desmina, la regeneración del músculo gastrocnemio mejoró por el aumento en el área de laminina aumentando la curación muscular.

Utilização de brocas trefina para a confecção de tissue microarray / Use of trephine drills for the production of tissue microarray

Objetivos: Descrever e validar uma técnica alternativa econômica e eficiente para a confecção de amostras teciduais com arranjo matricial (tissue microarrays, TMA). Materiais e métodos: Utilizou-se um motor, um micromotor, um contra-ângulo redutor 16:1 e brocas trefina de aço inoxidável para osso. Análise histomorfométrica do volume das células acinares de glândulas parótidas foi realizada. Para testar marcadores imunoistoquímicos para células mioepiteliais, acinares e ductais das parótidas foram utilizados calponina e PCNA. Resultados: Na análise macroscópica e microscópica das lâminas, não foi encontrada perda total do tissue e nem mesmo deslocamento (parcial e/ou total) deste, sendo as perdas teciduais observadas apenas parciais. Das 90 lâminas analisadas, 59 (65%) obtiveram de 50% a 100% do tissue com ausência de artefato, deslocamento ou perda de tecido. Conclusão: O equipamento proposto pelos autores para a confecção deamostras teciduais com arranjo matricial representa uma alternativa econômica e eficiente.

Objectives: To describe and validate an inexpensive and efficient alternative for the production of tissue microarrays (TMA). Materials and methods: An electric-motor, a hand-piece, a reducing contra-angle hand-piece 16:1 and trephine stainless steel drills for bones were used in this study. A histomorphometric assessment of the volume of the acinar cells of parotid glands was performed. Calponin and PCNA were used to test the immunohistochemical markers for myoepithelial, acinar and ductal cells of parotid glands. Results: During the macroscopic and microscopic analysis, total loss of sections was not observed in any slide as well as artifactual ungluing (total and/or partial) of the sections. The loss of sections was partial. Fifty nine (65%) out of 90 slides showed 50%-100% of the tissue without technical artifact, artifactual ungluing or loss of the section. Conclusion: The equipment proposed by the authors for the production of arrays represents an inexpensive and efficient alternative.

Diminuição da expressão imuno-histoquímica de moléculasde adesão em carcinomas escamosos de mucosa oral / Reduction of immunohistochemical expression of adhesion molecules in squamous carcinoma of oral mucosa

Objetivos: Comparar a expressão imuno-histoquímica da E-caderina e da Beta-catenina de lesões escamosaspré-neoplásicas e neoplásicas de mucosa oral de amostras emblocadas em parafina. Materiais e métodos:Foram selecionadas 15 amostras de mucosa oral de pacientes apresentando hiperplasia com ou sem displasialeve (grupo 1); 5 amostras apresentando displasia moderada, acentuada ou carcinoma in situ (grupo 2); e12 amostras apresentando carcinoma de células escamosas invasor (grupo 3). Essas amostras foram submetidasà técnica de imuno-histoquímica com anticorpos primários monoclonais anti-E-caderina e anti-Betacatenina.A leitura em microscopia óptica compreendeu a expressão tecidual desses marcadores no epitélioescamoso das amostras de mucosa oral – lesadas ou não. A expressão imuno-histoquímica dessas moléculasde adesão foi classificada, segundo a sua intensidade de marcação tecidual, em negativa, positiva fraca epositiva forte. Resultados: A expressão de E-caderina foi forte em 93,3% dos casos do grupo 1 (hiperplasia/displasia leve), e 100% dos casos demonstraram forte expressão para a Beta-catenina nesse mesmo grupo. Contudo, no grupo 3 (carcinoma de célula escamosa), somente 42% dos casos foram fortemente positivospara E-caderina e 25% deles para Beta-catenina. Conclusões: A E-caderina e a Beta-catenina diminuíram asua expressão segundo a progressão tumoral do carcinoma de mucosa oral, reforçando um dos mecanismosrelacionados com a sua carcinogênese.

Objectives: To compare the immunohistochemical expression of E-cadherin and Beta-catenin in squamous pre-malignant and malignant lesions of formalin fixed paraffin embedded buccal mucosa samples. Materials e methods: Selected 15 samples of buccal mucosa of patients with hyperplasia with or without mild dysplasia (group 1), 5 samples showing moderate dysplasia, severe or carcinoma in situ (group 2) and 12 samples presenting invasive squamous cell carcinoma (group 3). These samples were subjected to immunohistochemistry with anti-E-cadherin and anti-Beta-catenin monoclonal antibodies. The expression of these markers in tissue samples injured or not were analyzed in accordance of positivity that was observed in epithelium stratum. The immunohistochemical expression of these adhesion molecules was classified according to their intensity in negative, weak positive and strong positive. Results: The expression of E-cadherin was strong at 93.3% of patients in group 1, and 100% of the cases showed strong expression of Beta-catenin in the same group. However, in group 3, only 42% of cases were strongly positive for E-cadherin and 25% of them to Beta-catenin. Conclusions: The E-cadherin and Beta-catenin decreased their expression according to tumor progression, from hiperplasia/mild dysplasia lesion to buccal invasive carcinoma and this fact may be related of the carcinogenesis mechanisms.

Immunohistochemical assessment of E-cadherin, beta-catenin, CEACAM-1 and PTEN: tumor progression markers in melanoma / Análise imuno-histoquímica dos marcadores de progressão tumoral, E-caderina, beta-catenina, CEACAM-1 e PTEN em melanomas

INTRODUCTION AND OBJECTIVE: The aim of the present study is the immunohistochemical assessment of tumor progression markers (E-cadherin, β-catenin, CEACAM-1 and PTEN) in primary cutaneous melanomas and their correlation with prognostic factors. METHOD: Primary lesions in patients with cutaneous melanoma were recorded as to clinical data (age, gender, location and metastases) and anatomopathologic data (Breslow, Clark level, margins, histological type, mitosis, ulceration, regression, satellitosis and TIL type). It was made a comparison between immunohistochemical expression of the markers and prognostic and anatomopathologic factors. RESULTS: Breslow thickness was > 1 mm (thick) in 21 patients (48.83 percent) and < 1 mm (thin) in 22 (51.16 percent). There was a higher CEACAM-1 positive expression in thick melanomas than in thin ones (p = 0.002). There was a more frequent E-cadherin (p = 0.008), b-catenin (p = 0.001) and PTEN (p = 0.005) positive expression in thin melanomas than in thick ones. There was a more frequent CEACAM-1 positive expression in superficial (p = 0.003) and deep (p = 0.002) samples of thick melanomas than in thin ones. No statistically significant differences between clinical and histopathological data were found when comparing patients with (n = 6) and without metastasis (n = 15). DISCUSSION AND CONCLUSION: There was a higher positivity for E-cadherin, b-catenin and PTEN in thin melanomas, whereas there was a higher positivity for CEACAM-1 in thick melanomas.

INTRODUÇÃO E OBJETIVO: O objetivo do presente estudo está na avaliação imuno-histoquímica de marcadores de progressão tumoral (E-caderina, β-catenina, CEACAM-1 e PTEN) em melanomas cutâneos primários e sua correlação com fatores prognósticos. MÉTODO: Lesões primárias de pacientes portadores de melanoma cutâneo foram tabuladas quanto a dados clínicos (idade, sexo, localização e metástases) e anatomopatológicos (Breslow, nível de Clark, margens, tipo histológico, mitoses, ulceração, regressão, satelitose e tipo de TIL). Foi realizada comparação da expressão imuno-histoquímica dos marcadores em estudo com fatores prognósticos clínicos e anatomopatológicos. RESULTADOS: Breslow foi > 1 mm (espesso) em 21 pacientes (48,83 por cento) e ≤ 1 mm (fino) em 22 (51,16 por cento). CEACAM-1 foi mais positivo em melanomas grossos que em finos (p = 0,002). E-caderina (p = 0,008), β-catenina (p = 0,001) e PTEN (p = 0,005) foram mais frequentemente positivos em melanomas finos que em grossos. CEACAM-1 foi mais frequentemente positivo nas porções superficiais (p = 0,003) e profundas (p = 0,002) dos melanomas grossos que nas dos finos. Não houve diferenças estatisticamente significativas entre dados clínicos e histopatológicos quando comparamos os pacientes com (n = 6) e sem (n = 15) metástases. DISCUSSÃO E CONCLUSÃO: Observou-se maior tendência de positividade para E-caderina, b-catenina e PTEN em melanomas finos. Por sua vez, CEACAM-1 demonstrou maior frequência de positividade nos melanomas grossos.

Linfangite granulomatosa de genitália infantil: relato de caso e revisão da literatura / Granulomatous lymphangitis of children's genitalia: report of a case and review of the literature

Linfangite granulomatosa de genitália não-infecciosa é causa rara de linfedema genital autolimitado e idiopático em crianças(4, 6, 9). A maioria dos casos de linfedema com granuloma não-infeccioso de genitália em pacientes jovens ocorre em associação à doença de Crohn subseqüente ou concomitante(1, 3, 4, 9). O caso relatado é de um menino de 14 anos que apresentava história de linfedema genital principalmente em região dorsal do corpo do pênis, poupando prepúcio, parte distal do pênis e saco escrotal. Estudos laboratoriais não revelavam doenças sistêmicas. O exame anatomopatológico da peça revelou tratar-se de linfangite granulomatosa não-infecciosa.

Non-infectious granulomatous lymphangitis of genitalia is a rare cause of self-limited and idiopathic genital lymphoedema in children(4, 6, 9). Most cases of lymphoedema with non-infectious genital granulomas in young patients occur subsequent to or concomitant with Crohn's disease(1, 3, 4, 9). The case described is of a 14-year-old boy with history of genital lymphoedema mainly on the dorsal region of the body of the penis, sparing the prepuce, the distal part of the penis and the scrotum. Laboratory studies did not reveal systemic diseases. The histopathological analysis showed it was non-infectious granulomatous lymphangitis.

Cirrose hepática e hemocromatose neonatal secundária associadas à tirosinemia tipo 1: relato de um caso e diagnóstico diferencial com hemocromatose primária hereditária / Liver cirrhosis and secondary neonatal haemochromatosis associated to type 1 tyrosinemia: case report and differential diagnosis with hereditary haemochromatosis

Uma paciente de 4 meses de idade foi encaminhada ao hospital por aumento de volume abdominal, cianose e febre há dois meses. Ao exame, apresentou hepatoesplenomegalia. Com os resultados laboratoriais constatou-se anemia hipocrômica microcítica, leucocitose, plaquetopenia e provas de função hepática alteradas. Levantou-se a hipótese de erros inatos do metabolismo. A paciente evoluiu desfavoravelmente e foi a óbito. A necropsia o fígado apresentou-se cirrótico e com grande depósito de ferro no parênquima. O diagnóstico anatomopatológico foi hemocromatose hereditária, no entanto os resultados laboratoriais confirmaram tirosinemia tipo 1. Tanto a hemocromatose primária quanto a tirosinemia evoluem com cirrose hepática, sendo que a segunda pode ocasionalmente levar ao depósito de ferro do tipo hemocromatose secundária, o que dificulta muito a diferenciação entre elas com bases puramente anatomopatológicas, acarretando, assim, um diagnóstico errôneo de hemocromatose hereditária. Esse diagnóstico diferencial muitas vezes só é possível com os achados de rastreamento de erros inatos do metabolismo.

Alteraçöes morfológicas em hepatócitos de Brachydanio rerio (Hamilton & Buchanan) exposto à açäo do endosulfan em dose subletal / Morphological changes in hepatocytes of Brachydanio rerio (Hemilton & Buckanan) exposed to a sublethal dose of endosulfan action

Realizou-se experimentos com o peixe "paulistinha" (Brachydanio rerio), tendo como objetivo observar o efeito tóxico do organoclorado endosulfan nas células hepáticas do peixe. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda, sendo determinado o valor de CL 50 - 96 h de 0,0021083 muL/L e os limites de confiabilidade estabelecidos entre 0,00175 e 0,00254 muL/L para o animal em estudo. Durante o experimento os peixes foram mantidos em meio contaminado num total de 96 h, observando-se os efeitos do produto nos hepatócitos a partir das primeiras 24 horas. As alteraçoes observadas após os tempos de exposiçao 24h, 48 h, 72 h, 96 h foram: descaracterizaçao da forma celular e da membrana plasmática, lateralizaçao nuclear, cromatina condensada na regiao central e núcleos picnóticos, grandes vacúolos citoplasmáticos e necrose focal. Após 48 horas de exposiçao as modificaçoes permaneceram, havendo regeneraçao dos hepatócitos. O tecido apresentou-se mais regular, houve aumento do citoplasma e a cromatina apresentou-se mais dispersa. Os resultados indicaram que o endosulfan é altamente tóxico para o peixe Brachydanio rerio, e que, apesar da sua rápida degradaçao na água, ocorre o acúmulo nos tecidos após a exposiçao ao pesticida. Estudos adicionais sobre a toxicidade do endosulfan a longo prazo seriam necessários, uma vez que algumas alteraçoes histológicas sugerem evoluçao de neoplasias.